Dvigubai aklas, placebu kontroliuojamas, atsitiktinių imčių tyrimas su žmonėmis, įvertinantis naujo galakto-oligosacharidų mišinio gebėjimą sumažinti keliautojų viduriavimą | europos klinikinės mitybos žurnalas

Dvigubai aklas, placebu kontroliuojamas, atsitiktinių imčių tyrimas su žmonėmis, įvertinantis naujo galakto-oligosacharidų mišinio gebėjimą sumažinti keliautojų viduriavimą | europos klinikinės mitybos žurnalas

Anonim

Anotacija

Pagrindiniai faktai / tikslai:

Prebiotikai sukėlė susidomėjimą dėl jų gebėjimo teigiamai paveikti storosios žarnos mikrobiotos sudėtį, taip padidindami atsparumą infekcijai ir viduriavimui. Šis tyrimas įvertino prebiotinio galakto-oligosacharido mišinio (B-GOS) veiksmingumą sveikų asmenų keliautojų viduriavimo (TD) sunkumui ir (arba) dažniui.

Dalykai / metodai:

Tyrimas buvo atliktas placebu kontroliuojamo, atsitiktinių imčių, dvigubai aklojo, lygiagretaus modelio, tyrime su 159 sveikais savanoriais, kurie mažiausiai 2 savaites keliavo į šalį, kurioje yra maža ar didelė TD rizika. Tiriamasis produktas buvo B-GOS, o placebas - maltodekstrinas. Savanoriai buvo atsitiktinai suskirstyti į grupes su tokia pačia tikimybe gauti arba prebiotiką, arba placebą. Protokolą sudarė 1 savaitės prieššventinis laikotarpis, kuriame buvo užfiksuotas žarnyno įprotis, kartu gavus intervenciją ir atostogų laikotarpį. Į žarnyno įprotį įeina tuštinimosi skaičius ir vidutinė išmatų konsistencija, taip pat diskomfortas pilve, pilvo pūtimas, pilvo pūtimas ar vėmimas. Buvo baigta klinikinė ataskaita dėl viduriavimo atvejų. Klausimyną po tyrimo taip pat užpildė visi grįžę asmenys.

Rezultatai:

Rezultatai parodė reikšmingus skirtumus tarp B-GOS ir placebo grupės pagal TD dažnį ( P <0, 05) ir trukmę ( P <0, 05). Panašios išvados buvo apie pilvo skausmą ( P <0, 05) ir bendrą gyvenimo kokybę ( P <0, 05).

Išvados:

Išbandyto galakto-oligosacharido mišinio vartojimas parodė didelę galimybę užkirsti kelią TD pasireiškimui ir simptomams.

Įvadas

Keliautojų viduriavimas (TD) yra viena iš labiausiai paplitusių sąlygų, kurią patiria asmenys, vykstantys į besivystančią šalį (Kamat ir Mathur, 2006). Tai užpuolimo dažnis yra 20–50%, ir apskaičiuota, kad sutrikimas gali paveikti daugiau nei 11 milijonų žmonių per metus (DuPont ir Capsuto, 1996; Peltola ir Gorbach, 2001). 90% pacientų, sergančių TD, simptomai pasireiškia per pirmąsias 2 kelionės savaites (Steffen ir kt., 1983). Pripažįstamas TD sindromo apibrėžimas yra „trys nuo keturių neformuotų išmatų per 24 valandas ir bent vienas iš šių simptomų, tokių kaip pilvo skausmas, pykinimas, vėmimas, karščiavimas, kraujas ar gleivės išmatose“ (Peltola ir Gorbach, 2001). Tyrimai parodė, kad bakterijos ir kai kurie virusai yra labiausiai paplitę TD sukėlėjai (Black, 1990; Paredes ir kt., 2000), kai 50% TD atvejų bakterinė priežastis yra enteroksigeninė Escherichia coli (Vila ir kt.). ., 2000).

Iki šiol TD valdymas buvo grindžiamas ligos gydymu, naudojant antibiotikus ir vaistus nuo viduriavimo, tokius kaip fluorochinolonai, ciprofloksacinas, rifaksiminas ir loperamidas (DuPont, 2001). Tačiau šie agentai taip pat gali turėti įtakos žarnos mikromens mikroorganizmų kompozicijai. Taigi alternatyvus ar papildomas prevencinio pobūdžio požiūris būtų labai įdomus.

Bifidobakterijos kartu su laktobakterijomis atlieka svarbią funkciją storosios žarnos mikrobiotos ekologinėje fiziologijoje. Šie organizmai buvo susieti su padidėjusiu atsparumu infekcijoms ir viduriavimo ligomis (Tojo ir kt., 1987; Saavedra ir kt., 1994). Prebiotikų naudojimo virškinimo trakto mikrobiotai ir funkcijai valdyti idėja pastaruoju metu sulaukia didelio susidomėjimo. Prebiotikai yra „nesuvirškinami maisto ingredientai, kurie daro teigiamą poveikį šeimininkui, selektyviai stimuliuodami vienos ar riboto skaičiaus bakterijų augimą ir (arba) aktyvumą storosios žarnos srityje, ir kurie tokiu būdu gali pagerinti šeimininko sveikatą“ (Gibson ir Roberfroid, 1995). Taip pat buvo pranešta, kad prebiotikai sukelia antimikrobinį poveikį daugiausia selektyviai stimuliuodami vietines naudingas gentis (daugiausia bifidobakterijas), kurios taip pat gali būti antipatogeninės (Kunz et al., 2000; Gibson et al., 2005).

Tarp įvairių oligosacharidų, patikrintų dėl galimo prebiotinio taikymo, buvo nustatyta, kad galakto-oligosacharidai (GOS) yra veiksmingi. Neseniai atliktas tyrimas parodė, kad tam tikras prebiotikas GOS (B-GOS) buvo veiksmingas padidinant bifidobakterijų skaičių (Tzortzis ir kt., 2005), paršelių storosios žarnos turinyje ir slopinant entero-kepenų E. coli prisirišimą ( P <0, 01). ) ir Salmonella enterica serotipo Typhimurium ( P <0, 01) HT29 ląstelėms in vitro . S. enterica serotipo Typhimurium kolonizacijos ir invazijos nuo specifinio prebiotinio ingrediento prevencija taip pat buvo patvirtinta pelių in vivo peroralinio užkrėtimo tyrime (Searle et al., 2009). Prebiotinės ir bifidogeninės B-GOS savybės dar buvo patvirtintos randomizuoto, dvigubai aklo, kryžminio, placebu kontroliuojamos intervencijos tyrimo, kuriame dalyvavo 59 sveiki suaugę žmonės, savanoriai (Depeint ir kt., 2008), taip pat dvigubai aklu būdu., kryžminio, placebu kontroliuojamo žmogaus tyrimas su 44 sveikais pagyvenusiais žmonėmis (Vulevic et al., 2008). Pastarajame tyrime taip pat buvo pranešta, kad B-GOS teigiamai veikia savanorių imuninę funkciją, padidindamas fagocitozę ir NK ląstelių aktyvumą.

Šios specifinio prebiotinio mišinio savybės (naudingųjų bakterijų skaičiaus padidėjimas, imuninės funkcijos stimuliavimas ir patogeninių bakterijų prisirišimo bei invazijos prevencija) suteikia galimybę naudoti B-GOS bakterijų sukeltos TD prevencijai ir (arba) sumažinimui.

Rezultatai

Iš viso buvo įdarbinta ir atsitiktinai atrinkta 201 tiriamoji, tačiau 42 vėliau tyrimo nebuvo baigta, iš jų 23 buvo paskirta placebo grupei, o 19 - bandymo (B-GOS) grupei. 1 paveiksle parodytas bendras asmenų skaičius, kurie įstojo ir baigė tyrimą, ir nepabaigimo priežastys. Penki tiriamieji nebuvo baigti dėl nepageidaujamų reakcijų, o pagrindinis jų skundas buvo lengvas pilvo skausmas, apie kurį buvo pranešta prieššventiniu laikotarpiu.

Image

Schema, kurioje pateikiamas tiriamųjų skaičius kiekviename tyrimo etape.

Visas dydis

Paskirties vietų pasiskirstymas buvo panašus tarp placebo ir prebiotikų grupės (2 lentelė). Iš viso tyrimą baigė 159 tiriamieji, iš kurių 81 vartojo B-GOS miltelius, o 78 - placebo grupėje. 2 lentelėje apibendrinta amžiaus grupė (vidutinis), lytis ir ankstesnė TD istorija.

Pilno dydžio lentelė

Dviejų grupių žarnyno įpročių duomenys (prieššventinė, atostogų), remiantis gautų ir užpildytų dienoraščių analize, pateikti 3 lentelėje ir nurodyti statistiškai reikšmingi skirtumai. Regresinė analizė parodė, kad tuštinimosi skaičius (vidutiniškai per dieną) žymiai padidėjo atostogų metu, palyginti su prieššventiniu laikotarpiu placebo grupėje ( P <0, 05), bet ne B-GOS grupėje ( P = 0, 12). Išmatų konsistencija ir pilvo skausmas reikšmingi skirtumai tarp prieš ir atostogų laikotarpių pasireiškė placebo grupėje ( P <0, 05), bet ne tarp B-GOS ( P = 0, 10). Tai nebuvo netikėta, nes viduriavimo dažnis ir trukmė buvo žymiai didesni ( P <0, 05) placebo grupėje, kaip vėliau analizuota toliau. Tačiau atostogų laikotarpiu nebuvo jokio skirtumo ( P = 0, 23) tarp dviejų gydymo būdų. Panaši vidurių pūtimo ir pilvo pūtimo analizė parodė, kad nei tyrimo laikotarpis, nei gydymas nepadarė reikšmingo poveikio.

Pilno dydžio lentelė

Išanalizavus viduriavimo ir susijusių simptomų klinikinių ataskaitų formas nustatyta, kad B-GOS daro didelę įtaką TD pasireiškimui ir trukmei.

4 lentelės duomenys rodo viduriavimo dažnį ir trukmę, taip pat kitų simptomų, tokių kaip pilvo skausmas, vėmimas, karščiavimas, anoreksija, galvos skausmas ir galvos svaigimas, trukmę. Tikslus Fišerio testas parodė, kad žymiai ( P = 0, 03) mažesnis skaičius savanorių, kurie vartojo B-GOS ( n = 19), atostogų laikotarpiu viduriavo, palyginti su placebo grupe ( n = 30). Regresinė analizė taip pat parodė, kad viduriavimo ir su tuo susijusių pilvo skausmų trukmė B-GOS grupėje buvo žymiai trumpesnė, palyginti su placebu, nepriklausomai nuo kelionės tikslo ar atostogų trukmės. Tiriamųjų, kuriems pasireiškė viduriavimas, gyvenimo kokybės klausimynas parodė aukštesnius rezultatus B-GOS grupėje, palyginti su placebo grupe ( P <0, 05).

Pilno dydžio lentelė

Kitų simptomų skirtumų tarp dviejų gydymo grupių nebuvo.

Diskusija

TD yra labai dažna problema keliaujantiems į užsienį verslo ar atostogų metu. Kadangi ūmaus viduriavimo priežastis yra užkrėsti organizmai, rekomenduojama profilaktika su antibiotikais kaip pagrindinis „gelbėjimo“ gydymas. Nepaisant to, 20–50% keliautojų vis dar patiria viduriavimą, todėl reikia imtis naujų prevencinių priemonių.

Remiantis tyrimais, kurie pranešė, kad viduriavimas išauga tiek vaikams, tiek suaugusiems, buvo pasiūlytas probiotinių bakterijų naudojimas kaip alternatyvus infekcijos ir viduriavimo ligų prevencijos būdas (Cremonini ir kt., 2002; Huang ir kt., 2002). Atsižvelgiant į konkrečius naudojamus padermes, buvo įrodyta, kad šios bakterijos arba prilimpa prie plonosios žarnos, ir tokiu būdu užkerta kelią patogeninių bakterijų prilipimui, arba kolonizuoja storąją žarną ir taip padidina atsparumą įsiveržusiems patogenams. Vis dėlto įrodyta, kad probiotikų vartojimo nauda prevencijai nuo TD yra ribota, tikriausiai dėl deformacijų stabilumo ir išgyvenamumo. Prebiotikai, kaip alternatyva, yra stabilesni nei probiotikai praeinant viršutinį virškinimo traktą ir sugeba sukelti antimikrobinį poveikį, pirmiausia selektyviai stimuliuodami vietines naudingas žarnų gentis (Vila ir kt., 2000; DuPont, 2001; Buddington). et al., 2002). Kita vertus, faktas, kad prebiotikai veikia daugiausia storojoje žarnoje, o infekcinis organizmas, sukeliantis TD, veikia plonojoje žarnoje, yra didelis apribojimas jų, kaip prevencinio gydymo nuo ūmaus viduriavimo, apribojimui, kaip buvo parodyta anksčiau naudojant frukto-oligosacharidus (Cummings ir kt., 2001). Norėdami išspręsti šią problemą, šiame tyrime mes nusprendėme naudoti oligosacharidų mišinį B-GOS, kuris, kaip pranešta, kad ne tik turi prebiotinių savybių, bet ir tiesiogiai sąveikauja su šeimininko epiteliu, užkertant kelią mažų virškinimo trakto patogenų adhezijai ir invazijai. žarnynas (Searle ir kt., 2009), taip pat teigiamai veikiantis imuniteto pažeidžiamo subjekto imuninę funkciją (Vulevic et al., 2008).

Šiame tyrime 31% dalyvavusių asmenų pranešė apie viduriavimą atostogų laikotarpiu. Iš jų 62% buvo placebo ir 38% B-GOS grupėje, parodant statistiškai reikšmingą skirtumą ( P <0, 05) tarp dviejų gydymo būdų. Be to, B-GOS grupės žmonių viduriavimas truko 2, 4 dienos, palyginti su 4, 6 dienos placebo grupėje ( P <0, 05), nors 34% placebo grupės savanorių buvo gydomi palengvėjimu ( tokių kaip loperamidas ar ciprofloxaminas), palyginti su 22% B-GOS grupėje. Bendras vidutinis dalyvių žarnyno judesių skaičius per atostogų laikotarpį tarp gydymo reikšmingai nesiskyrė, tačiau reikia pažymėti, kad pradinis (prieššventinis) skaičius B-GOS grupėje buvo žymiai didesnis, palyginti su placebu, rodantis reikšmingą intervencijų heterogeniškumas, atsižvelgiant į vidutinį kasdienį tuštinimosi skaičių.

Ankstesniame tyrime kito prebiotiko (frukto-oligosacharidų) vartojimas parodė reikšmingą vidurių pūtimo poveikį, kuris reikšmingai padidėjo frukto-oligosacharidų grupėje (Cummings ir kt., 2001). Nors to tikimasi dėl prebiotinių oligosacharidų dėl jų fiziologinių ir metabolinių savybių, šiame tyrime B-GOS vartojimas neparodė jokio žymaus poveikio vidurių pūtimui. Apie vidurių pūtimo, kaip šalutinio B-GOS poveikio, trūkumą buvo pranešta anksčiau atliekant klinikinį tyrimą, kuriame dalyvavo dirgliosios žarnos sindromu sergantys pacientai (Silk ir kt., 2009) ir kurio metu buvo skiriama B-GOS, panašiais kiekiais, kokie buvo naudojami šiame tyrime, žymiai sumažino pacientų vidurių pūtimą ir pilvo pūtimą. Ši B-GOS savybė buvo priskirta selektyviam oligosacharidų mišinio fermentavimui Bifidobacterium spp., Kurie negamina dujų, dėl jo paruošimo būdo.

Bendrosios savanorių gyvenimo kokybės analizė, pagrįsta balų skaičiavimo sistema, parodė, kad, nors viduriavimų nepatyrusių asmenų gydymas nesiskyrė, B-GOS grupėje dalyvavę žmonės pranešė, kad yra geresni ( P <0, 05) bendras ūminis viduriavimas, palyginti su placebo grupe, ūminio viduriavimo metu.

Apibendrinant galima pasakyti, kad šio tyrimo rezultatai rodo, kad žymiai mažiau asmenų, kurie vartojo gydymą B-GOS, viduriavimo epizodų per atostogų laikotarpį patyrė viduriavimas, palyginti su placebo grupe. Panašiai viduriavimo ir pilvo skausmo trukmė buvo žymiai trumpesnė B-GOS grupėje, palyginti su placebu ( P <0, 05), todėl šios patirties metu savanoriai pranešė apie geresnę gyvenimo kokybę. Nors tiksliam veikimo mechanizmui suprasti reikia papildomų tyrimų, šis teigiamas B-GOS poveikis, apie kurį nepastebėta kitų prebiotinių oligosacharidų, yra susijęs su padidėjusiu specifinio mišinio funkcionalumu, kuris, be prebiotinių savybių storosios žarnos, tiesioginė apsauga nuo patogeniško organizmo prilipimo ir invazijos plonojoje žarnoje bei imuninės funkcijos stimuliavimas, dėl kurio padidėja fagocitinių ir NK ląstelių veikla.

Interesų konfliktas

Dr Tzortzis dirba Clasado Ltd. Dr Drakoularakou, profesorius Rastall ir profesorius Gibson neturėjo jokių asmeninių ar finansinių interesų konfliktų.

Nuorodos

  1. Juodasis RE (1990). Keliautojų viduriavimo epidemiologija ir santykinė įvairių patogenų svarba. Užkrėsti „Dis 12“, S73 – S79.

      • PubMed
      • „Google Scholar“
  2. „Buddington KK“, „Danohoo JB“, „Buddington RK“ (2002). Dietinės oligofruktozės ir inulinas apsaugo pelę nuo žarnyno ir sisteminių patogenų bei naviko induktorių. J Nutr 132, 472–477.

      • CAS
      • PubMed
      • „Google Scholar“
  3. Ligų kontrolės ir prevencijos centras (CDC) (2008). Konkrečių infekcinių ligų prevencija. In: CDC sveikatos informacija tarptautinėms kelionėms . Atlanta, GA.

      • „Google Scholar“
  4. Cremonini F, Di Caro S, „Nista EC“ (2002). Metaanalizė: probiotikų vartojimo poveikis su antibiotikais susijusiam viduriavimui. „Aliment Pharmacol Ther 16“, 1461–1467.

      • CAS
      • PubMed
      • Straipsnis
      • „Google Scholar“
  5. Cummings JH, Christie S, Cole JT (2001). Fruktooligosacharidų tyrimas siekiant išvengti keliautojų viduriavimo. „ Aliment Pharmacol Ther 15“, 1139–1145.

      • CAS
      • PubMed
      • Straipsnis
      • „Google Scholar“
  6. Depeint F, Tzortzis G, Vulevic J, I'anson K, Gibson GR (2008). Prebiotinis naujojo galakto-oligosacharidų mišinio, pagaminto dėl Bifidobacterium bifidum NCIM 41171 fermentinio aktyvumo, vertinimas sveikiems žmonėms. „Am J Clin Nutr 87“ („Suppl“, 3), S785 – S791.

      • „Google Scholar“
  7. „DuPont HL“ (2001). Keliautojų viduriavimo gydymas. „J Travel Med 8“, S31 – S33.

      • CAS
      • PubMed
      • Straipsnis
      • „Google Scholar“
  8. „DuPont HL“, „Capsuto EG“ (1996). Nuolatinis keliautojų viduriavimas. Clin Infect Dis 22, 124–128.

      • CAS
      • PubMed
      • „Google Scholar“
  9. „Gibson GR“, „McCartney AL“, „Rastall RA“ (2005). Prebiotikai ir atsparumas virškinimo trakto infekcijoms. „Br J Nutr 93“, S31 – S34.

      • CAS
      • PubMed
      • Straipsnis
      • „Google Scholar“
  10. „Gibson GR“, MB „Roberfroid“ (1995). Žmogaus storosios žarnos mikrobiotos dietinis moduliavimas: prebiotikų sąvokos įvedimas. J Nutr 125, 1401–1412.

      • CAS
      • PubMed
      • „Google Scholar“
  11. Huang JS, Bousvaros A, Lee JW, Diaz A, Davidson EJ (2002). Probiotikų vartojimo efektyvumas sergant ūminiu viduriavimu vaikams: metaanalizė. Dig Dis Sci 47, 2625–2634.

      • CAS
      • PubMed
      • Straipsnis
      • „Google Scholar“
  12. Kamat D, Mathur A (2006). Keliautojų viduriavimo prevencija ir valdymas. „Travel Med 52“ („Suppl“, 7), 289–302.

      • „Google Scholar“
  13. Kunz C, Rudloff S, Baier W, Klein N, Strobel S (2000). Oligosacharidai motinos piene: struktūriniai funkciniai ir metaboliniai aspektai. „Ann Rev Nutr 20“, 699–722.

      • CAS
      • Straipsnis
      • „Google Scholar“
  14. Paredes P, Campbell-Forrester S, Mathewson JJ, Ashley D, Thompson S, Steffen R et al . (2000). Keliautojų viduriavimo etiologija Karibų saloje. J Kelionės Med 7, 15–18.

      • CAS
      • PubMed
      • „Google Scholar“
  15. „Peltola H“, „Gorbach SL“ (2001). Keliautojų viduriavimo epidemiologija ir klinikiniai aspektai. In: Dupont H, Steffen R (red.). Kelionių medicinos ir sveikatos vadovėlis . „BC Decker Inc“, Hamiltonas: Kanada. 151–159 psl.

      • „Google Scholar“
  16. Saavedra JM, Bauman NA, Oung I, Perman JA, Yolken RH (1994). Bifidobacterium bifidum ir Streptococcus thermophilus maitinimas ligoninėse viduriavimo prevencijai ir rotaviruso išsiskyrimui. „Lancet 344“, 1046–1049.

      • CAS
      • PubMed
      • Straipsnis
      • „Google Scholar“
  17. „Searle LEJ“, „Best A“, „Nunez A“, „Salguero FJ“, „Johnson L“, „Weyer U“ ir kt . (2009). Bifidobacterium bifidum NCIMB 41171 fermentinio aktyvumo būdu pagamintas galakto-oligosacharidų mišinys sumažina pelių Salmonella Typhimurium infekciją. J Med Microb 58, 37–48.

      • Straipsnis
      • „Google Scholar“
  18. Šilkas DBA, Davis A, Vulevic J, Tzortzis G, Gibson GR (2009). Klinikinis tyrimas: prebiotiko transgalaktooligosacharido poveikis išmatų mikrobiotai ir dirgliosios žarnos sindromo simptomai. „ Aliment Pharmacol Ther 29“, 508–518.

      • CAS
      • PubMed
      • Straipsnis
      • „Google Scholar“
  19. Steffen R, Van Der Linde F, Gyr K, Schär M (1983). Keliautojų viduriavimo epidemiologija. JAMA 249, 1176–1180.

      • CAS
      • PubMed
      • Straipsnis
      • „Google Scholar“
  20. Tojo M, Oikawa T, Morikawa Y, Yamashita N, Iwata S, Satoh Y (1987). Bifidobacterium breve vartojimo poveikis Campylobacter enteritui. „Acta Pediatr“ , JPN 29, 160–167.

      • CAS
      • Straipsnis
      • „Google Scholar“
  21. Tzortzis G, Goulas AK, Gee JM, Gibson GR (2005). Naujas galaktooligosacharidų mišinys padidina bifidobakterijų populiacijų skaičių nuolatinėje in vitro fermentacijos sistemoje ir proksimaliniame kiaulių dvitaškyje in vivo . J Nutr 135, 1726–1731.

      • CAS
      • PubMed
      • „Google Scholar“
  22. JAV maisto ir vaistų administracija (2008). Maisto saugos ir taikomosios mitybos centras. Maisto priedų saugos tarnyba. „GRAS“ pranešimo Nr. CRN 000236. Internetas: //www.cfsan.fda.gov/ ∼ rdb / opa-g236.html (pasiekta 2008 m. Lapkričio 6 d.).

      • „Google Scholar“
  23. Vila J, Vargas M, Ruiz J, Corachan M, Jimenez De Anta MT, Gascon J (2000). Atsparumas chinolonams enterotoksigeninėje Escherichia coli organizme, sukeliantis viduriavimą keliautojams į Indiją, palyginti su kitomis geografinėmis teritorijomis. Antimikrobiniai agentai „Chemother 44“, 1731–1733.

      • CAS
      • PubMed
      • Straipsnis
      • „Google Scholar“
  24. Vulevic J, Drakoularakou A, Yaqoob P, Tzortzis G, Gibson GR (2008). Sveikų pagyvenusių savanorių išmatų mikrofloros profilio ir imuninės funkcijos moduliavimas nauju trans-galaktooligosacharidų mišiniu (B-GOS). Am J Clin Nutr 88, 1438–1446.

      • CAS
      • PubMed
      • „Google Scholar“
  25. Pasaulio sveikatos organizacija (2004). WHOQOL tyrimo protokolas. PSO 2004 MNH7PSF / 93.9.

      • „Google Scholar“

Atsisiųskite nuorodas

Padėkos

Finansinė parama buvo pasiūlyta iš „Clasado Ltd.“ dotacijos. Visus duomenis išanalizavo dr. Drakoularakou.