Endotelio azoto oksido sintazės genetinis kitimas ir esminės hipertenzijos rizika hanų kinuose: Fangšano tyrimas | žmogaus hipertenzijos žurnalas

Endotelio azoto oksido sintazės genetinis kitimas ir esminės hipertenzijos rizika hanų kinuose: Fangšano tyrimas | žmogaus hipertenzijos žurnalas

Anonim

Iš genų kandidatų, kurie, kaip manoma, yra logiški atsižvelgiant į asmens hipertenzijos jautrumą, endotelio azoto oksido (NO) sintazės genas (baltymas: eNOS ir genas: eNOS ) yra aukštas. Gauta įrodymų, kad padidėjęs fermento eNOS, sintetinančio NO endotelio ląstelėse, gamyba arba biologinis prieinamumas gali sąlygoti NO išsiskyrimą, kuris daro vazoprotekcinį poveikį kraujospūdžio (BP) reguliavimui. 1, 2

„ ENOS“ apima 21 kb su 26 egzonais 7q35–36 chromosomoje. Kandidatavimas į eNOS hipertenzijos vystymuisi turi tvirtą biologinį pagrindą. Pelės, kurioms trūko eNOS, patyrė hipertenziją, kaip ir suaugusios. 2 Priešingai, eNOS cDNR indukcija pelėms sumažino BP. 3 Kadangi eNOS genominė seka yra labai polimorfinė, šiuos duomenis papildomai įdomu patvirtinti, kuris (-iai) eNOS variantas (-ai) gali turėti funkcinį potencialą, kad galėtų paveikti galutinį eNOS biologinį prieinamumą, taigi ir hipertenzijos vystymąsi. Tačiau genetinių asociacijų tyrimai, susiję su ryšiu tarp eNOS variantų ir hipertenzijos, davė nenuoseklų rezultatą. 4, 5, 6 Matomas nenuoseklumas paprastai atspindi statistikos galios stoką dėl mažo imties dydžio. Norėdami išspręsti šią problemą, mes sutelkėme dėmesį į didelę Hano kinų populiaciją, norėdami ištirti galimą trijų labiausiai tirtų eNOS variantų (T − 786C, 4a / b ir G894T), tiek atskirai, tiek kaip haplotipų, ryšį su esmine hipertenzija.

Visi tiriami dalykai yra kinų Fangshan Hano, kuris dalyvavo populiacijos tyrime, kaip aprašyta kitur. 7 Įdarbinome 1305 nesusijusius hipertenzija sergančius asmenis (vyrai / moterys: 712/593), kurių amžius <60 metų ir kuriems buvo sistolinis BP140 mm Hg arba diastolinis BP90 mm Hg, ir jiems nebuvo atlikta antrinė hipertenzijos forma atliekant išsamius laboratorinius ir klinikinius tyrimus. ir be jokio antihipertenzinio gydymo. Be to, mes surinkome 1154 normaliai aktyvius asmenis (vyrai / moterys: 469/685), kurių sistolinis BP / diastolinis BP buvo mažesnis kaip 140/90 mm Hg ir kurie neturėjo šeiminės hipertenzijos anamnezės. BP matavimus gaudavo patyrę egzaminuotojai pagal standartinį protokolą, kurį rekomendavo Amerikos širdies asociacija. 8 Šį tyrimą patvirtino Pekino sąjungos medicinos koledžo etikos komitetas, ir buvo gautas rašytinis kiekvieno asmens sutikimas.

Genominė DNR buvo išgauta iš leukocitų ir genotipas buvo aptiktas PGR, naudojant restrikcijos analizę, kai tinkama. G894T amplifikacija buvo atlikta naudojant pradmenis 5′-TCCCTGAGGAGGGCATGAGGCT-3 ′ (prasmė) ir 5′ – TGAGGGTCGCACAGGTTCCT-3 ′ (antisense). Restrikcijos fermentas Mbo I atpažino amplifikuotą fragmentą (206 bp), kai buvo 894T (119 bp ir 87 bp). T-786C ir 4a / b variantai buvo genotipizuoti pagal ankstesnę ataskaitą. 1 Niu ir Qi laboratoriniai genotipai buvo atlikti, atsižvelgiant į atvejo kontrolės būklę. Kad būtų išvengta klaidingo klasifikavimo pagal genotipą, kiekvienam PGR arba suardytam produktui buvo pridėtas žinomas žymeklis. Taip pat kiekvienas genotipas buvo patvirtintas DNR sekos nustatymu (BGI LifeTech Co., Ltd., Pekinas, Kinija).

Statistinės analizės buvo atliktos naudojant SAS 9.1.3 versiją (Institute Inc., Cary, NC, JAV). Hardy – Weinbergo pusiausvyra ir genotipo / alelio pasiskirstymo skirtumai buvo apskaičiuoti χ 2- testu. Kiekvienas genotipas buvo įvertintas atliekant logistinę regresinę analizę, darant prielaidą, kad priedai (pagrindiniai homozigotai prieš heterozigotus prieš mažas homozigotas), dominuojantys (pagrindiniai homozigotai palyginti su heterozigotai plius nedideli homozigotai) ir recesyvūs (pagrindiniai homozigotai plius heterozigotai, palyginti su nedideliais homozigotų būdais). Dvipusis P <0, 05 buvo priimtas kaip statistiškai reikšmingas.

EH / EH + programa, alelių asociacijų vaizdavimo tikimybės metodas, buvo naudojama įvertinti haplotipų dažnius, kurie buvo lyginami tarp atvejo ir kontrolės grupių χ 2- testu iš 2 × 2 nenumatytų atvejų lentelių serijos derinant kitus haplotipus. Bonferronu pataisytas P <0, 00625 (0, 05 / 8) buvo laikomas reikšmingu.

Nebuvo jokių nukrypimų nuo Hardy – Weinberg pusiausvyros, išskyrus G894T hipertenzinėje grupėje ( P <0, 05). Pastebėta reikšmingų T-786C ir 4a / b genotipų ir alelių pasiskirstymų bei G894T genotipo pasiskirstymo skirtumų (1 lentelė). Kiekvieno varianto logistinės regresijos analizės rezultatai parodė reikšmingas T – 786C asociacijas (šansų santykis (OR) dominuojantis = 1, 52; 95% pasikliautinasis intervalas (CI): 1, 22–1, 88; P = 0, 0002), 4a / b (ARBA dominuojantis = 1, 29; 95% PI: 1, 06–1, 58; P = 0, 0110) ir G894T (ARBA recesyvus = 2, 10; 95% PI: 1, 20–3, 67; P = 0, 0092), padidėjus esminės hipertenzijos rizikai. Visų tirtų variantų genotipų amžiaus, kūno masės indekso, BP ir plazmos lipidų lygio reikšmingų skirtumų nepastebėta (žr. Internetinę medžiagą, 2 papildomą lentelę).

Pilno dydžio lentelė

Iš aštuonių skirtingų trijų tirtų variantų haplotipų derinių H1 (OR = 2, 90; 95% PI: 2, 10–4, 01; P <0, 0001) ir H2 (OR = 11, 12; 95% PI: 3, 31–69, 16; P) haplotipai. = 0, 0011) padidėjo esminės hipertenzijos rizika, tuo tarpu H 3 (OR = 0, 58; 95% PI: 0, 42–0, 80; P = 0, 0008) ir H 5 (OR = 0, 69; 95% PI: 0, 53–0, 89; P =) haplotipai (OR = 0, 58; 95% PI: 0, 42–0, 80; P = 0, 0008); 0, 0053) sumažėjo rizika net atlikus Bonferroni pataisą.

Kinija yra vieninga daugiatautė šalis, turinti daugiausiai gyventojų pasaulyje. Norėdami padidinti tyrimų galią ir sumažinti genetinį nevienalytiškumą, mes sutelkėme dėmesį į santykinai vienalytę Han populiaciją. 8 Siūloma, kad norint gauti patikimus duomenis, gali prireikti daug didesnio mėginio, apimančio> 1000 tiriamųjų kiekviename pogrupyje; 9 mūsų imties dydžiai patvirtino mūsų sugebėjimą tai padaryti. Šis, mūsų žiniomis, populiacijos pagrįstas atvejo ir kontrolės tyrimas iki šiol buvo didžiausias tyrinėjant trijų plačiausiai tirtų eNOS variantų ar jų derinių ryšį su esmine hipertenzija.

Hipertenzinėje grupėje stebėjome reikšmingą G894T pusiausvyros sutrikimą. Genotipo paklaida yra mažai tikėtinas paaiškinimas dėl aklino genotipo įvertinimo ir griežto genotipo sudarymo protokolo. Kaip teigė Wigginton et al. , 10 nukrypimų nuo Hardy – Weinberg pusiausvyros, ypač paveiktiems asmenims, gali įrodyti ryšį tarp žymens ir jautrumo ligai. Taigi, tai dar rodo, kad G894T gali būti genetinis esminės hipertenzijos žymeklis.

Nors „ eNOS“ ryšio palaikymo nepavyko gauti, 11 dviejų naujausių metaanalizių atskleidė teigiamą ryšį tarp eNOS variantų ir hipertenzijos. 5, 6 Viena metaanalizė, kurią atliko Zintzaras ir kt. 5 rezultatai parodė teigiamą ryšį tarp 4a / b varianto ir hipertenzijos recesyviniu režimu, kai 4b aleliai sudaro 22% mažesnę hipertenzijos riziką tarp visų gyventojų ir 24% mažesnę riziką kaukaziečiams. Kita Pereira ir kt. Metaanalizė . 6 nustatė, kad 4a alelio nešiotojams hipertenzijos rizika padidėjo 28%, palyginti su šiais 4b alelių homozigotiniais. Šiame tyrime mes nustatėme, kad 4a alelių nešiotojai padidino hipertenzijos riziką ( P = 0, 0110) 29%, palyginti su 4b / 4b kolegomis, o tai atitiko Pereira ir kt. Rezultatus. 6 Nors mes nustatėme, kad 4b alelis buvo susijęs su 27% sumažėjusia hipertenzijos rizika recesyviniu režimu, panašiai kaip Zintzaras et al. , 5 šio tyrimo metu reikšmingo šio varianto ryšio su esmine hipertenzija nepastebėta. Šis neatitikimas gali būti dėl mažo 4a homozigotų dažnio.

Kadangi atskirų variantų analizė gali būti klaidinanti, įtikinami įrodymai rodo ryškesnį haplotipų vaidmenį tiriant eNOS variacijos įtaką hipertenzijai. 7 Anksčiau Wang ir kt. 12 tyrė skirtingų eNOS variantų poveikį transkripcijos aktyvumui ir nustatė, kad −786C-4b derinys turėjo aukščiausią transkripcijos aktyvumą. Neseniai atliktas tyrimas, įvertinęs haplotipu pagrįstą hipertenzijos riziką, parodė, kad haplotipas −786C-4b-894G buvo susijęs su apsauginiu poveikiu hipertenzijos rizikai. Mūsų haplotipo rezultatai patvirtino šias išvadas Kinijos populiacijoje ir patvirtino galimą T-786C ir 4a / b variantų sąveiką. Čia galima padaryti dvi galimas išvadas. Viena iš jų yra ta, kad −786C-4a derinio veikimas H1 ir H2 hipotipais turėjo svarbią funkciją ir turėjo rizikos laipsnį pagrindinei hipertenzijai. Kitas poveikis yra genų sinergetinis veiksmas, nes riziką mažinantys H 3 (−786C-4b-894G) ir H 5 (−786T-4a-894G) haplotipai turėjo alternatyvų alelį pirmose dviejose vietose; priešingu atveju negalima pasiekti nuoseklaus dviejų haplotipų vaidmens. Nors statistinis reikšmingumas buvo stebimas tiek atskirai, tiek kartu, BP skirtumas tarp šių trijų variantų genotipų išlieka nereikšmingas. Tai atveria galimybę, kad ištirti variantai, kurių bendras indėlis yra minimalus ir galbūt neaptinkamas, tačiau vertinant pagal kitą (-us) geną (-us), yra nereikšmingas. Taigi norint gerai išsiaiškinti specifinį šių variantų vaidmenį ligos patogenezėje, reikia gerai suplanuotų tyrimų su daugybe variantų ir perspektyviu dizainu.

Atsižvelgiant į imties dydį, T-786C ir 4a / b variantų sąveika gali atlikti svarbią funkciją esminės hipertenzijos patogenezėje Han Kinijos populiacijoje. Ar ši sąveika paveiks eNOS gamybą ar biologinį prieinamumą, lieka atviras klausimas, o tai sustiprina poreikį įvertinti šių variantų funkcines pasekmes.

Image

Papildoma informacija

„Word“ dokumentai

  1. 1.

    2 papildoma lentelė