Nuo endotelio priklausomas atsipalaidavimas atsparus azoto oksido sintezės slopinimui, tačiau jautrus kalcio suaktyvintų kalio kanalų blokavimui esant esminei hipertenzijai | žmogaus hipertenzijos žurnalas

Nuo endotelio priklausomas atsipalaidavimas atsparus azoto oksido sintezės slopinimui, tačiau jautrus kalcio suaktyvintų kalio kanalų blokavimui esant esminei hipertenzijai | žmogaus hipertenzijos žurnalas

Anonim

Anotacija

Esant žmogaus esminei hipertenzijai (EH), endotelio priklausomas atsipalaidavimas gali vykti nepriklausomai nuo azoto oksido (NO) ir prostaciklino (SGN 2 ). Naujausi in vivo duomenys rodo, kad, norint išsaugoti vazorelaksaciją sumažėjusio NO biologinio prieinamumo sąlygomis, vyksta greitas kompensacinis endotelio citochromo P 450 epoksigenazės 2C9 reguliavimas. Kadangi vienas iš CYP2C9 kraujagyslių veiksmų yra modifikuoti mažo ir vidutinio laidumo endotelio kalcio suaktyvintus kalio kanalus (SK Ca ir IK Ca ), mes ištyrėme, ar nuo endotelio priklausomas poilsis yra jautrus šių kanalų inhibitoriams (apaminui ir charybdotoksinui). - dydžio indai iš žmogaus su EH. Po oda buvo atlikta 12 žmonių, sergančių EH, ir 12 tiriamųjų kontrolinių asmenų poodinė skrandžio biopsija. Atsparios arterijos buvo išpjaustytos ir relaksacijos reakcijos į karbacholį ex vivo buvo įvertintos naudojant vielos miografiją, esant: (i) N G -nitro-L-argininui (L-NOOG) / indometacinui; ir (ii) apaminas / charybdotoksinas. Maksimalus karbacholio atpalaidavimas buvo sutrikdytas EH, palyginti su kontroliniais asmenimis. Nuo endotelio nepriklausomo agonisto S- nitrozo- N -acetil-penicilamino reakcijų skirtumų nepastebėta. Po inkubacijos su L -NOARG / indometacinu kontrolinių asmenų kraujagyslėse ( P <0, 01 dispersijos analizė (ANOVA)), bet ne EH sergančių pacientų induose, buvo atpalaiduotas karbacholis. Po apamino / charybdotoksino reakcija buvo atvirkštinė, o karbacholio relaksacija buvo susilpninta tik EH induose ( P <0, 001 ANOVA). Nuo endotelio priklausomas poilsis yra atsparus endotelio azoto oksido sintazės slopinimui, tačiau jautrus kalcio suaktyvintų kalio kanalų blokavimui žmogaus EH. Norint nustatyti, ar šį atsaką sąlygoja endotelio kalio kanalų potipiai (SK Ca ir IK Ca ), reikia atlikti tyrimus su konkretesniais inhibitoriais.

Įvadas

Žmogaus esminei hipertenzijai (EH) būdingas sumažėjęs azoto oksido (NO) biologinis prieinamumas. 1 Daugybė, 2, 3, 4, bet ne visų, 5, 6 tyrimų duomenimis, agonistai, stimuliuojantys su endotelio G baltymais sujungtus receptorius, įskaitant acetilcholiną (ACh), karbacholį ir bradikininą, mažina mažų kraujagyslių relaksaciją. Naujausi in vivo žmogaus dilbio pletismografijos tyrimų duomenys rodo, kad ACh relaksacija EH yra atspari endotelio azoto oksido sintazės (eNOS) 7 inhibitoriams ir kad būdai, nepriklausomi nuo NO ir prostaciklino (SGN 2 ), tarpininkauja arterijų atsipalaidavimui tokiomis sąlygomis. 8 Neseniai paskelbtas Taddei ir kt. Tyrimas . 9 pranešė, kad ACh atsakai tiriamųjų, turinčių EH, dilbyje yra jautrūs sulfafenazolo, citochromo P 450 epoksigenazės (CYP2C9) inhibitoriaus, smegenų kraujotakos infuzijoms. Remdamiesi šiais duomenimis, šie tyrėjai rodo, kad CYP2C9 produktas (11, 12 epoksieikozatrieno rūgšties (11, 12 EET)) vaidina pagrindinį vaidmenį žmogaus EH kaip endotelio išvestas hiperpolarizuojantis faktorius (EDHF), sukeliantis greitą kompensuojamąjį vazorelaksaciją. sumažėjusio NO biologinio prieinamumo sąlygos. 9

EDHF yra sudėtingas ir daugialypis atsakas, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, atliekantis ypač svarbų vaidmenį mažesnio atsparumo dydžio induose. Pelių, kurių organizme trūksta eNOS ir ciklooksigenazės, įrodymai yra 18, 19, nors ir ne visuotiniai, 14, atitinkantys šį siūlomą kompensacinį vaidmenį EDHF tarpininkaujamam arteriniam relaksacijai NO trūkumo sąlygomis. Žmogaus kraujagyslėse, kaip žinoma, suaktyvinimas iš endotelio priklausomų kalio kanalų, ypač mažo (SK Ca ) ir vidutinio laidumo (IK Ca ) laidumų, vaidina pagrindinį vaidmenį atliekant endotelio ląstelių hiperpolarizaciją, kuri yra esminė daugelyje EDHF tarpininkaujamų atsakų. . Yra nemažai įrodymų, kad 11, 12 EET veikia endotelio ląstelėse, kad padidintų ar „sustiprintų“ šių kanalų jautrumą kalciui, nors jis taip pat gali sukelti atsipalaidavimą per se kertant mioendotelinę erdvę, kad veiktų lygiųjų raumenų ląstelių didelio laidumo kalcį. -aktyvuoti kalio kanalai (BK Ca ). 21 Šiame tyrime mes ištyrėme, ar nuo endotelio priklausomas atsipalaidavimas mažo atsparumo arterijose iš EH sergančių pacientų yra jautrus bendram SK Ca (apamino), IK Ca ir BK Ca (charybdotoksino) slopinimui.

medžiagos ir metodai

Dvylika 30–65 metų amžiaus vyrų, sergančių EH (vidutinis sistolinis BP> 160 mm Hg arba diastolinis BP> 90 mm Hg, išmatuoti trimis egzemplioriais, naudojant standartizuotą metodą, mažiausiai tris kartus) 22 buvo įdarbinti iš Glazgo karališkosios ligoninės hipertenzijos klinikos. . Pacientai, sergantys cukriniu diabetu, anksčiau turėję širdies ir kraujagyslių sistemos sutrikimų ar vartoję statinus, nebuvo verbuojami. Prireikus paskirtas antihipertenzinis vaistas buvo nutrauktas 14 dienų prieš tyrimo vertinimą. Iš sveikų savanorių grupės taip pat buvo įdarbinta dvylika sveikų kontrolinių asmenų. Visus vertinimus atliko vienas tyrėjas (CS). Protokolą patvirtino Šiaurės Glazgo ligoninių universiteto NHS pasitikėjimo etikos peržiūros komitetas; visi tiriamieji davė visiškai pagrįstą rašytinį sutikimą ir tyrimas atitiko Helsinkio deklaracijos principus. 23

Gleivinės biopsija

Dalyviai pasninko metu susilaikė nuo rūkymo mažiausiai 12 valandų. Iš kiekvieno dalyvio buvo įprasti poodiniai riebalai (3–5 g), kuriems taikoma vietinė nejautra (lidokainas 1%), pagal standartinius metodus. Audinys buvo nedelsiant dedamas į šaltą 0, 9% NaCl, prieš tai perpilant į PSS tirpalą (NaCl 118, 4, KCl 4, 7, MgSO 4 · H 2 O 1, 2, KH 2 PO 4 1, 2, NaHCO 3 24, 9, CaCl 2 2, 5, gliukozė 5, 5, EDTA 0, 023). m M (pH 7, 4), kai dujos išmetamos su 5% CO 2 /95% O 2 mišiniu).

Myografinis protokolas

Arterijų paruošimas

Iš kiekvienos EH ir kontrolinės biopsijos buvo išpjaustytos mažiausiai dvi maždaug 2 mm ilgio ir mažesnio kaip 300 μm skersmens arterijos, be riebalų, kurios buvo sumontuotos ant dviejų 40 μm skersmens nerūdijančio plieno laidų ant keturių kanalų Mulvany – Halpern vielos. myografas (danų „Myotech“, Danija). Temperatūra buvo pakeista iki 37 ° C, o eksperimento metu dujų mišinys (kaip aukščiau) perfuzuotas.

Normalizavimas

Po montavimo indams buvo atliktas normalizavimo protokolas. 25 Trumpai tariant, po 45 minučių poilsio laikotarpio kiekviena arterija buvo ištempta kas 1 min., Kad būtų galima nustatyti pasyvaus eksponentinio sienos įtempio ir vidinio perimetro (L) santykį. Iš Laplaso lygties, kur P = T / r (kur P yra efektyvusis slėgis, T yra sienos įtempis, o r yra vidinis spindulys), buvo apskaičiuotas ekvivalentinis apskritimo perimetras ( L 100 ), kai slėgis yra 100 mm Hg: kiekvienas indas pakartojamu metodu. Tada kiekvienam indui buvo nustatytas normalizuotas vidinis skersmuo, L 1 = 0, 9 L 100 / π , kai manoma, kad susitraukimas yra optimalus. Po valandos indai buvo eksponuojami didelės koncentracijos (123 mM) kalio (KPSS, natris, pakeistas kaliu ekvimoliariais pagrindais) serijoje 5 minutes, kol buvo pasiekti pakartojami maksimalūs susitraukimai. Po to buvo patikrintas endotelio vientisumas kiekvienoje kraujagyslėje, užtikrinant vazorelaksaciją iki karbacholio ( 10–5 M), prieš tai susiaurinant su norepinefrinu (3 × 10 –7 M).

Farmakologinis įvertinimas

Abiejuose kanaluose pirmąjį eksperimentą sudarė išankstinis sutraukimas su 3 × 10 –7 M norepinefrinu (NE), po to kaupiamasis karbacholio (nuo 10–9 iki 10 –5 M) pridėjimas, po to išplovimas PSS. Po to 1 kanalo indas 30 min. Inkubuotas su N G -nitro-L-argininu (L-NOOG) (10 - 4 M) ir indometacinu (10 - 5 M) [kartu slopinant NO sintazę / ciklo-oksigenazę. ], o 2 kanalo indas tuo pačiu metu 30 min. inkubuotas su apaminu ( 10–7 M) ir charybdotoksinu ( 10–7 M), kad slopintų SK Ca, IK Ca, BK Ca. Vėliau abiejų kanalų laivams buvo pakartotinai suvaržyta 3 × 10 –7 M norepinefrino, po to pridėta kaupiamo karbacholio (nuo 10–9 iki 10 –5 M) ir nuplaunama PSS. Galiausiai abiejų kanalų induose buvo įvertintas kumuliacinis atsakas į nuo endotelio nepriklausomą vazodilatatorių agonistą S- nitrozo- N -acetil-penicilaminą (SNAP), pridedant didėjančias koncentracijas (10 –9 –10 –5 M).

Statistinė analizė

Rezultatai išreiškiami kaip vidurkis ± sem. Relaksaciniai atsakai į karbacholį išreiškiami procentais pagal maksimalų išankstinį susiaurėjimą iki NE. Kontraktiliniai atsakai į NE išreiškiami atsižvelgiant į maksimalų KPSS susitraukimą (procentais). Kaupiamosios koncentracijos - kreivės, gautos naudojant karbacholį ir SNAP, atveju buvo apskaičiuota pD2 (neigiama agonisto log koncentracija, reikalinga 50% reakcijai). 50% atsakas (reikalingas apskaičiuojant pD2) nebuvo gautas po inkubacijos su L-NOOG / indometacinu ar apaminu / charybdotoksinu tiriamoje koncentracijos intervale, šie atsakymai buvo lyginami naudojant pakartotinių matavimų vienpusį ANOVA. pD2 ir maksimalios atsako vertės buvo palygintos naudojant Studento t- testą (neporinis).

Rezultatai

Dalykai

Pradinės kontrolinių ir hipertenzinių asmenų charakteristikos pateiktos 1 lentelėje. Trys iš 12 hipertenzija sergančių asmenų vartojo angiotenziną konvertuojančio fermento inhibitorius, o penki vartojo β blokatorius iki dviejų savaičių prieš tyrimą; keturi pacientai anksčiau nebuvo gydyti, nė vienas iš jų nebuvo vartojęs angiotenzino II receptorių blokatorių.

Pilno dydžio lentelė

Atsparumo arterijos

Visi tiriamieji gerai toleravo biopsijos procedūrą. Vidutinis (pusiau) išpjaustytų varžos arterijų vidinis skersmuo buvo 337, 8 ± 21, 1 μm nuo EH ir 312, 9 ± 12, 5 μm nuo kontrolinių asmenų ( P = 0, 29). Tarp grupių nenustatyta maksimalaus kontraktilinio atsako į NE ar KPSS skirtumų (maksimalus KPSS susitraukimas 3, 57 ± 0, 25 mN / mm hipertenzija sergantiems pacientams, palyginti su 3, 26 ± 0, 18 mN / mm kontrolinėse grupėse).

Nuo endotelio priklausomas poilsis

Poilsis iki karbacholio

Hipertenzija sergantiems asmenims nustatytas reikšmingas maksimalaus atsipalaidavimo sutrikimas ( P <0, 05), nors pD2 skirtumo nenustatyta (1 pav.).

Image

Laivai, gauti iš hipertenzinių ( n = 12) ir kontrolinių ( n = 12) asmenų: vidutinis ± sem kumuliacinis atsakas į karbacholį (10–9–10 –5 M) po išankstinio susiaurinimo su norepinefrinu 3 × 10 –7 M. ** P <0, 01 - maksimalus atsakas.

Visas dydis

L-NOOG / indometacino ir apamino / charybdotoksino poveikis

Kontroliniai subjektai

Po inkubacijos su L-NOARG / indometacinu ( P <0, 01 ANOVA) pastebėtas susilpnėjęs karbacholio atpalaidavimas. Po inkubacijos su apaminu / charybdotoksinu reikšmingo silpnėjimo nepastebėta (2a paveikslas).

Image

Laivai iš hipertenzija sergančių asmenų ( n = 12) ir kontrolinės grupės ( n = 12): vidutinis kumuliacinis atsakas į karbacholį po gydymo arba (i) L-NOARG (10 - 4 M), ir indometacinu (10 - 5 M) arba (ii). apaminas ( 10–7 M l) ir charybdotoksinas ( 10–7 M) ( ** P <0, 01 ir *** P <0, 001 palyginimui tarp parodytos koncentracijos ir reakcijos kreivių ir bazinių karbacholio koncentracijos ir atsako kreivių atitinkamoms grupėms, pateikė ANOVA (žr. 1 paveikslą). a ) valdikliai; Gydytas L-NOARG / indometacinu - atviri apskritimai. Apaminu / charybdotoksinu apdoroti - uždari apskritimai. b ) hipertenzija sergantys asmenys; L-NOARG / indometacinu apdoroti - atviri kvadratai. Apaminu / charybdotoksinu apdoroti - uždari kvadratai.

Visas dydis

EH subjektai . Po inkubacijos su apaminu ir charybdotoksinu ( P <0, 001 ANOVA) (priešingai nei stebint kontrolinių tiriamųjų kraujagyslėse) stebėta silpnesnė relaksacija iki karbacholio (2b pav.). Po inkubacijos su L-NOARG / indometacinu reikšmingas relaksacijos sumažėjimas nebuvo pastebimas.

Nuo endotelio nepriklausomas poilsis

Tarp EH ir kontrolinių indų nepastebėta jokio atsipalaidavimo skirtumo nuo SNAP (maksimalus arba pD2) (3 paveikslas).

Image

Kraujagyslių iš hipertenzinių ( n = 12) ir kontrolinių ( n = 12) asmenų: vidutinis ± pusinis kumuliacinis atsakas į SNAP (10–9–10 –5 M) po išankstinio susiaurėjimo su norepinefrinu 3 × 10 –7 M.

Visas dydis

Diskusija

Laikydamiesi daugelio ankstesnių tyrimų 2, 3, 4, mes pastebėjome nedidelį maksimalų arterijų atsipalaidavimo sutrikimą, atsirandantį nuo endotelio priklausomo agonisto karbacholio, mažose atsparumo arterijose, atskirtose nuo žmogaus skrandžio biopsijos iš pacientų, sergančių EH. Dar svarbiau, kad mes pranešame, kad nuo endotelio priklausomas poilsis šiuose induose buvo atsparus bendram eNOS ir PGI 2 slopinimui, tačiau jautrus kalcio suaktyvintų kalio kanalų blokavimui. Pastarasis stebėjimas atitinka ankstesnių ir naujausių dilbio tyrimų in vivo 7, 9 rezultatus, nes jis susijęs su NO ir PGI 2 nepriklausomais keliais, tarpininkaudamas arterijų atsipalaidavimui esant susilpnėjusiam NO biologiniam prieinamumui. Mūsų ex vivo atradimai, naudojant inhibitorius, netinkamus vartoti in vivo, praplečia ankstesnes žinias, nes jie rodo šio atsako vaidmenį EH suaktyvinti kalcio suaktyvintus kalio kanalus, 20 kurie, kaip žinoma, sąveikauja su CYP2C produktu 11, 12 EET tarpindami endotelį. -priklausoma hiperpolarizacija daugelyje kraujagyslių lovų. 21

Anksčiau kai kuriuose 2, 3, 4, bet ne visuose 5, 6 EH tyrimuose buvo pranešta apie sutrikusią relaksacijos reakciją į acetilcholino (ACh) ir kitus nuo endotelio priklausomus agonistus. Kraujagyslių tyrimo metodų, tiriamo kraujagyslės dydžio, eksperimentinių sąlygų ir paciento atrankos (įskaitant ligos trukmę ir lytį) skirtumai gali paaiškinti kai kuriuos iš šių neatitikimų. Visai neseniai paaiškėjo, kad mažiausiai trys nepriklausomai reguliuojami mechanizmai 20, 21 vaidina svarbų vaidmenį nuo endotelio priklausomose relaksacijos reakcijose. Reikėtų pažymėti, kad daugelio aukščiau paminėtų tyrimų metu nebuvo tinkamų inhibitorių, leidžiančių oficialiai išskaidyti santykinį NO, PGI 2 ir kitų medžiagų išsiskyrimą, ir net dabar, kai reikia įvertinti kalcio suaktyvintų kalio kanalų vaidmenį yra per daug toksiški skiriant in vivo .

Atsižvelgiant į tai, kad mes ir kiti 9 pranešėme apie akivaizdžiai kompensuojamą arterinį atsipalaidavimą eNOS ir ciklooksigenazės slopinimo sąlygomis, kyla pagunda kreiptis į EDHF ar susijusį mechanizmą. Manoma, kad endotelio SK Ca ir IK Ca aktyvacijos įrodymas yra kritinis priimtai EDHF apibrėžčiai. 20 Mūsų naudojamas inhibitorius charybdotoksinas, kuris, be IK Ca ir SK Ca, blokuoja BK Ca kanalus ant lygiųjų raumenų ląstelių, neatmeta galimybės, kad 11, 12 EET gali tiesiogiai veikti per mioendotelinę erdvę. Nors toks mechanizmas atsiranda endotelyje ir apima lygiųjų raumenų ląstelių hiperpoliarizaciją, jis nėra laikomas „tarpininkaujant EDHF“, nes mediatorius yra žinomas. 20 Norint išsiaiškinti šią problemą, reikia atlikti papildomus tyrimus, naudojant konkretesnius IK Ca inhibitorius, tačiau tai nepaneigia mūsų pastebėjimo, kad nuo endotelio priklausomas poilsis buvo skirtingai jautrus kalcio suaktyvintų kalio kanalų slopinimui EH, palyginti su kontroliuojamais žmonėmis.

Kaip aptarta aukščiau, neseniai paskelbtoje ataskaitoje buvo nustatyta, kad CYP2C9 produktas 11, 12 EET yra kompensuojamasis arterinis atsipalaidavimas EH. 9 Atsižvelgiant į tai, kad 11, 12 EET yra susijęs su tarpląsteliniu SK Ca ir IK Ca jautrumo kalciui reguliavimu, 21 mes manome, kad mūsų rezultatai atitinka aiškinimą, kad „EDHF tarpininkaujamos“ reakcijos, susijusios su keliais, reguliavimas padeda išsaugoti arterijas. atsipalaidavimas esant tokiai būklei. Tačiau mes pripažįstame, kad padėtis yra sudėtinga ir egzistuoja alternatyvūs aiškinimai; Pavyzdžiui, EH gali būti pakeista 11, 12 EET metabolizacija tirpios epoksidinės hidrolazės būdu, arba lygiųjų raumenų ląstelės gali parodyti padidintą 11, 12 EET jautrumą. Kitas sudėtingumas yra tas, kad ne tik sintetindamas 11, 12 EET, CYP2C9 taip pat gali generuoti superoksido anijonus, ypač esant nustatytai vainikinių arterijų ligai. 27 Tačiau atvirkštinis sulfafenazolo slopinimas nuo endotelio priklausomo relaksacijos EH metu vykstant vitamino C infuzijai neatitinka CYP2C, kaip svarbaus oksidacinio streso šaltinio, vaidmens. 9

Minėjimą, kad arterinis atsipalaidavimas gali būti išsaugotas esant lėtiniam sumažėjusiam NO biologiniam prieinamumui, patvirtina minėti tyrimai, kuriuose dalyvavo 18, 19 eNOS trūkumų turinčių pelių, turinčių eNOS, ir arterijų, atsparumo arterijose tyrimai, ir išsiaiškinta atlikus tyrimus su pelėmis, kurioms trūksta eNOS ir ciklooksigenazės. –1. 28 Pastarajame modelyje vyrams buvo akivaizdus aukštas kraujospūdis, kurio atsakai „ne NO, ne SGN 2 “ buvo daug silpnesni nei moterų. Šie stebėjimai rodo priežastinį ryšį tarp mažų kraujagyslių EDHF sukelto atsako ir kraujospūdžio fenotipo ir pateikia vienos endotelio vazodilatatorių sistemos gebėjimo kompensuoti, kai sutrinka kita, bent graužikų modeliuose ir per ilgesnį laiką, pavyzdį. Kitas tinkamas pavyzdys - pranešta, kad endotelio relaksacijos reakcijų į bradikininą priklausomybė nuo endotelio relaksacijos reakcijų į bradikininą ne pagal NO priklausomybę nuo balionų pažeidimo ir kiaulių vainikinių arterijų atstatymo (kuriose 11, 12 EET vaidina svarbų vaidmenį). 29

Ar EDHF tipo kompensacija gali atsirasti ūmiai? NO donorai gali greitai slopinti kultivuotų žiurkių aortos lygiųjų raumenų ląstelių hiperpoliarizaciją ir ACh sąlygotą relaksaciją, jei kartu slopinami eNOS ir ciklooksigenazė. 29 Aukščiau minėto Taddei ir kt. In vivo tyrimo rezultatai . 9 taip pat atitinka ūminį CYP2C reguliavimą NO. Tačiau iki šiol buvo manoma, kad SK Ca ir IK CA atsakai, ištirti šiame tyrime, nepriklausomai nuo CYP2C, ir jų neturi biologinis prieinamumas. 20

Nors mūsų tyrime buvo atlikti išsamūs ir kruopščiai atlikti matavimai, kurių metu nedaugeliui tiriamųjų trūko duomenų, jis turi aiškių trūkumų. Hipertenzija sergantys pacientai buvo gerai suderinti su kontroliniais pacientais dėl amžiaus ir nevalgius gliukozės, tačiau jie buvo nutukę (vidutinis KMI 31, 0 vs 26, 1 kg / m 2, 1 lentelė). Atsižvelgiant į palyginti nedidelį tiriamų asmenų skaičių, nebuvo įmanoma atlikti pagrįstos statistinės individualių arterinių reakcijų korekcijos; tačiau kraujagyslių rezultatai (duomenys nepateikti) nepakito, kai buvo paimti vieno sunkiausio hipertenzijos ir lengviausio kontrolinio tiriamojo duomenys, mažinantys KMI skirtumą (pakoreguotas vidutinis KMI 30, 3 vs 26, 6 kg / m 2 ).

Atsižvelgiant į tai, kad mes dirbome su nedidelėmis biopsijomis, kurias vienkartiškai dovanojo žmonių dalyviai, mes panaudojome gana specifinį agonistų ir inhibitorių asortimentą, todėl turėjome ribotą supratimą apie išsamius mechanizmus. Mes panaudojome tik vieną nuo endotelio priklausomą agonistą (karbacholis, stabilus ACh analogas, parinktas remiantis mūsų paskelbta patirtimi 30, 31 ) ir panaudojome kombinuotą L -NOARG ir indometacino slopinimą, o ne atskirą PGI 2 ir NO slopinimą. atsakymai. Mes nenagrinėjome L -NOARG / indometacino pridėjimo prie jau esamos apamino / charybdotoksino blokados poveikio karbacholio atpalaidavimui ar atvirkščiai. Šis požiūris būtų leidęs išsamiau ir kiekybiškai įvertinti atskirų sistemų santykinius vaidmenis. Nors mes įrodėme, kad lygiųjų kraujagyslių raumenys buvo panašiai jautrūs NO EH ir kontroliniams asmenims, vartojantiems nuo endotelio priklausomą agonistą SNAP, mes neištyrėme karbacholio relaksacijos ar inhibitorių poveikio endotelyje atskirtose kraujagyslėse (kas mums būtų leidę daugiau įsitikinę, kad skirtumus, kuriuos stebėjome, priskiriame endotelio mechanizmams). Galiausiai mes neįtraukėme į kontrolinį eksperimentą, kuriame dalyvavo oksihemoglobinas (NO kaupiklis), kad pašalintume nejautrų L – NOOGG NO išsiskyrimą nei šviesai jautriuose, nei adventiniuose sandėliuose.

Nepaisant šių apribojimų, mūsų rezultatai, atsižvelgiant į naujausius literatūros duomenis, leidžia atlikti teleologines spekuliacijas, kurios EH reguliuojant nuo NO ir SGN 2 nepriklausomus kelius gali bent iš dalies kompensuoti pablogėjusį endotelio priklausomą atsipalaidavimą tokiomis sąlygomis. sumažintas NO biologinis prieinamumas. Lieka neaišku, ar tai gali įvykti per trumpą laiką, ar jis gali būti išlaikytas per tam tikrą laiką, ar jis skiriasi tarp asmenų ir ar tai gali prisidėti prie fiziologinio ar patofiziologinio žmogaus kraujospūdžio reguliavimo. Kadangi tiek NO, tiek EDHF sukeliamos reakcijos turi kitokį poveikį nei kraujagyslių tonusui (įskaitant antitrombocitinį aktyvumą, ląstelių adhezijos slopinimą, bazinės membranos sudėties reguliavimą; ląstelių proliferacijos ir angiogenezės reguliavimą), egzistuoja galimybė, kad keičiasi vyraujantis arterinis atsipalaidavimas kartu su patofiziologine būkle gali prisidėti prie širdies ir kraujagyslių sistemos prognozės pokyčių. Nesvarbu, ar taip yra, ar ne, mūsų išvados turi aiškų reikšmę būsimiems klinikiniams tyrimams, kuriuose vertinama endotelio funkcija naudojant nuo endotelio priklausomus agonistus, tokius kaip ACh ir karbacholis, nesant NO / EDHF inhibitorių, ypač EH.

Apibendrinant, mes pranešame apie naują išvadą, kad nuo endotelio priklausomas žmogaus EH atsipalaidavimas yra atsparus bendram eNOS ir PGI 2 slopinimui, tačiau jautrus kalcio suaktyvintų kalio kanalų blokavimui. Šis pastebėjimas atitinka naujausias in vivo dilbio kraujotakos tyrimų su pacientais, sergančiais EH, ataskaitas, kad nuo NO ir PGI 2 nepriklausomi keliai gali tarpininkauti arterijų atsipalaidavimui susilpnėjusio NO biologinio prieinamumo sąlygomis. Jei patvirtinsime, mūsų pastebėjimai, kurie taip pat atitinka kai kuriuos turimus duomenis apie transgeninius graužikų modelius, gali padėti suprasti sudėtingą patofiziologiją, kuria grindžiamas žmogaus EH.

Image

Interesų konfliktai

Nė vienas.

Žodynas

BK Ca

dideli laidumo kalcio suaktyvinti kalio kanalai

COX

ciklooksigenazė

CYP2C9

citochromo P 450 epoksigenazė 2C9

EDHF

endotelio išvestas hiperpolarizuojantis faktorius

„eNOS“

endotelio azoto oksido sintazė

11, 12 EET

11, 12 epoksieikozatrieno rūgštys

IK Ca

vidutinio laidumo kalcio suaktyvinti kalio kanalai

NE

norepinefrino

NE

azoto oksidas

L -NOARGAS

N G -nitro- L -argininas

2 SGN

prostaciklinas

SK Ca

nedideli laidumo kalcio suaktyvinti kalio kanalai

SNAP

S- nitrozo- N -acetil-penicilaminas