Sėkmingas vidinių ribojančių membranų pavyzdžių paėmimas | akis

Sėkmingas vidinių ribojančių membranų pavyzdžių paėmimas | akis

Anonim

Pone

Vidaus ribojančios membranos (ILM) žievelė atliekama atliekant planinės vitrektomijos atvejus, kai yra diabetinė geltonosios dėmės edema, 1, 2, kaip pagalbinė priemonė epiretininės membranos žievei 3, 4, ir atliekant geltonosios dėmės chirurgiją. 5, 6 Yra tam tikrų ginčų dėl procedūros naudos, todėl dažnai reikia histologinių tyrimų, siekiant nustatyti ILM žievelės naudingumą. Pavyzdžiui, histopatologinis pašalinto audinio įvertinimas yra svarbus norint išsiaiškinti chirurginio skilimo plokštumas ir nervinio audinio buvimą ar nebuvimą nulupto ILM tinklainės pusėje, taip pat norint patvirtinti pašalinto audinio pobūdį.

Neįmanoma pastebėti, kad ILM audinių mėginius histologiškai paimti sunku dėl jų mažo dydžio ir skaidrios savybės. Dėl šių savybių audinys gali būti lengvai pamestas nuo pašalinimo iš akies iki įdėjimo į histologinę terpę, tokią kaip vaškas. 7, 8 Šių mažų pavyzdžių atsigavimo greičiui pagerinti buvo panaudota daugybė metodų, įskaitant ištraukimą į mažus fiksatorių kiekius, nedidelį kiekį rašalo ar dažų užtepimą ant mėginio turinčio skysčio (tam, kad nusidažyti ir tokiu būdu vizualizuoti ILM) ir pavyzdžio „sudėjimas“ į sulankstytą popierių. 7, 8

Neseniai priėmėme dar du šių metodų pakeitimus, kurie, mūsų pastebėjimu, padidino mūsų sėkmingo ILM pavyzdžių išgavimo procentą ir priartėjo prie 100% iškirptų ILM pavyzdžių. Pirmasis modifikavimas apima bandinio uždėjimą ant 1 × 1 cm šlapios instrumentinės marlės (BD Visiwipe, JAV) tiesiai iš tinklainės žnyplių, kurios buvo naudojamos nulupti ILM. Šlapios instrumentinės marlės mikroporinis pobūdis „čiulpia“ mėginį prie jo paviršiaus, taip išlaikydamas jį tvirtą ir lygų, kaip galima pastebėti, jei ILM pašalinamas Indocyanine Green (ICG) pagalba (1a ir b paveikslai). . Tada marlė su pritvirtintu mėginiu perpilama į buteliuką su mėginiu, kuriame yra 20 ml 10% formalino. Svarbu greitai perkelti mėginį į buteliuką, kuriame yra formalino, nes mikroporinis audinio marlės pobūdis linkęs ištraukti iš mėginio vandenį ir galėtų jį trapinti.

Image

a) Trys ICG dažyto ILM gabalėliai ant šlapio instrumento glaisto. b) Alcian mėlynai dažytas ILM pavyzdys. c) Histologinis ILM įvertinimas.

Visas dydis

Antrasis modifikavimas atliekamas laboratorijoje. Net tada, kai audinys buvo pašalintas naudojant tokius operacinius dažus, kaip ICG arba Trypano mėlynas, bandinys, pasiekęs laboratoriją, paprastai atgaudavo skaidrumą. Todėl laboratorijoje į bandinio buteliuką įpilama 1–2 lašai 1% alciano mėlynos spalvos 3% acto rūgšties (praskiestas santykiu 1:10, pH 2, 5) ir paliekama 2 valandoms, kad mėginys vėl būtų dažytas. Alcian blue yra polivalentiškų dažų, tirpus vandenyje, grupė. Mėlyna spalva atsiranda dėl vario molekulių ir dažo epitelio ląstelių mukopolisacharidą bei jungiamojo audinio mucinus, nors dažys kiekvieną audinio komponentą ilgesnį laiką. Tada buteliuko turinys supilamas į indą su laivu, o dabar labai mėlynai dažytas mėginys lengvai paimamas į apvyniojamą audinį ir toliau apdorojamas šviesos ar elektronų mikroskopijai (1b paveikslas).

Mūsų patirtis rodo, kad nulupto ILM histologija nekeičia šių pakeitimo modifikacijų (1c paveikslas). Šiuo metu mes vertiname procedūrą, kad nustatytume, ar modifikacijos keičia imunohistochemines ILM savybes.